CysDisplay

CysDisplay ist eine neuartige und sehr effiziente Display-Technologie zur Selektion hochaffiner Binder aus Antikörperbibliotheken unter Verwendung von filamentösen Phagen.

Charakteristika von CysDisplay

• Vollständig kompatibel mit der HuCAL-Technologie
• Geeignet für alle Antigentypen und ein breites Anwendungsspektrum
• Besonders gut geeignet für das automatisierte Antikörperscreening im Hochdurchsatz mit dem firmeneigenen AutoCAL-System

CysDisplay vereinigt die Vorteile einer Phage Display-Technologie, wie der Kopplung von Phänotyp und Genotyp, mit dem zusätzlichen Merkmal einer spaltbaren Disulfidbindung. Diese ermöglicht die effiziente Elution der interagierenden Partner während des Panning-Verfahrens. CysDisplay basiert auf der gleichzeitigen periplasmatischen Expression von gentechnisch veränderten Phagen-Hüllproteinen und Antikörperfragmenten, die beide einen ungepaarten Cysteinrest aufweisen. Die Disulfid-Brückenbindung zwischen beiden Partnern bewirkt eine Heterodimerisation und anschließende Inkorporation dieser Heterodimere in die Phagenpartikel, was zu einem monovalenten Display funktioneller Antikörperfragmente auf der Phagenoberfläche führt. Die Disulfidverbindung kann durch Zugabe eines Reduktionsmittels gespalten werden. Ein effizientes Elutionsprotokoll für die Rückgewinnung von Phagen, welche spezifische Antikörperfragmente von hoher Affinität aufweisen, steht daher zur Verfügung. Dieses Elutionsprotokoll ist für jeden Antigentyp anwendbar und eignet sich daher ideal für Hochdurchsatz-Anwendungen.

Beim Phagen-Display handelt es sich um eine Technik, die eine Verbindung zwischen der genetischen Information für einen Antikörper - dem Genotyp - und dem eigentlichen Antikörper-Protein - dem Phänotyp - herstellt. CysDisplay stellt eine verbesserte Version des Phagen-Displays dar und erlaubt es, Antikörper-tragenden Phagen, die an ein gegebenes Antigen binden, gezielt durch die Spaltung einer Disulfid-Brückenbindung zwischen dem Phagen und dem präsentierten Antiköper zu gewinnen. Hierdurch ermöglicht der Einsatz von CysDisplay, dass alle spezifischen Bindungs-moleküle unabhängig von ihrer Bindungsstärke zum Antigen isoliert werden können.

Vorteile von CysDisplay gegenüber monovalentem Phage Display

Die Elution der Binder (Phagenpartikel, die Antikörper präsentieren) vom Antigen während des Standard-Selektionsprozesses in der Automatisierung ist unabhängig von der Affinität des Binders zum Antigen. Dies bedeutet:

• Alle spezifischen Binder werden vom Antigen eluiert
• Elution von unspezifisch bindenden Phagen wird verhindert
• Die Nutzung einer Elutionsbedingung für alle Binder unabhängig von ihrer Affinität ist möglich

CysDisplay ist deshalb besonders geeignet für das Antikörperscreening im Hochdurchsatz mit Hilfe von AutoCAL.